2.2 高温下鉴定米质

水稻米质受温度影响较大，同一水稻品种在高温下米质表现较差，低温下米质较优。温敏型两系不育系仅在低温条件下可自交结实，若直接用不育系的种子作米质分析，其结果是不准确的，因此需要借助可以正常结实的杂合体在高温环境下收种鉴定米质。从F2开始选择优良可育单株收种，鉴定米质保留优质米单株。每世代多选单株种成株系，保证后代有不育株分离出来，再从有不育株分离出来的株系继续选择可育优质米单株，以保证每个世代选择出的单株都具备优质的特性。

2.3 高世代分离不育株

随着世代增加，一般以5代为界，此时，多数农艺性状陆续稳定，仅在育性上存在分离。这个时候可从后代选择表型优良的不育株。在不育株的选择过程中应注意几个重要的性状：柱头外露率，开花是否集中，天然异交结实率，这关系到杂交组合的制种产量潜力；应选择包颈较重的不育株，然后辅助花粉镜检，一般包颈较重意味着育性转换温度较低。根据镜检结果，选择无花粉型>典败类型>圆败类型，这是由花粉败育时期决定的，败育时期越早败育越彻底。

2.4 不育株自交加代，稳定优良性状，获得一系列优良不育系材料

黄冈夏季高温环境下，在不育系幼穗分化4期，从每个株系选择3～5株长势比较好的单株，利用冷水串灌等设施辅助鉴定不育系的育性转换温度。用23 ℃的冷水对不育系进行低温处理，10 d左右（可适当延长）从冷水池移至大田。抽穗时保留目测败育的单株进行花粉镜检，选择育性达标单株割蔸低温处理，处理温度21 ℃，再生穗收种。对大田中没有冷水处理的不育系可观察记录高温下各株系的开花习性，如柱头外露率、花时等。不育系周围可种植一定的恢复系，以比较不育系的自然异交结实率。

海南低温条件下，对不育系综合性状进一步筛选。观察不育系在低温环境下的自交结实情况和繁殖产量。同时，可以利用分子标记对含有稻瘟病抗源的后代进行辅助选择和接种鉴定。

3 配合力测定

成批的不育系被选择出来后要做适当的取舍。不育系的选育是为了测配杂交组合，因此配合力尤其是一般配合力是不育系尤为重要的一个性状，因此有必要对它们做一个简单的配合力测验。

根据已有报道和所在课题组多年测配数据，选择不同类型，一般配合力好的恢复系5～10个。分两期播种（两期恢复系播种时间和间隔根据不育系生育期设置，尽量与多的不育系花期相遇，两期恢复系间隔5～10 d为宜），将不育系种植于恢复系旁，每个不育系种1～2行。整个田间设置参考杂交制种，不同的是不育系数量较多。扬花期赶粉获得相应组合的种子，次年种成株系观察综合性状，并进行测产。根据测产结果选择配合力较好的不育系，并继续进行测配组合。

4 讨论

1）温敏型两系不育系的选育方法大同小异。较多育种者在低世代即开始选择不育性状。温敏型两系不育系低温结实的特性使得低世代选出来的不育株无法保障米质。本研究提供的思路可以有效选育优质的温敏型两系不育系，易于配组优质杂交稻组合，提高了选育效率。

2）两系不育系育性转换温度主要体现在临界转育温度上和育性敏感期对低温的耐受期长短。有些不育系遇到短期低温育性即会波动，有些不育系则只有受到一定长度的低温期育性才会受到影响。因此，育性温敏感期对低温的耐受性的鉴定显得尤为重要，且鉴定操作较为复杂。目前，不育系的审定还无法鉴定不育系的低温耐受性，这为两系杂交稻的种子生产埋下隐患。

3）两系不育系在生产上被广泛应用，因此有必要更深入地探究两系不育系临界转换温度的遗传机理；两系杂交水稻生产中应用的光温敏不育基因绝大多数（>95%）由3种独立来源的不育系衍生而来，即光敏不育系农垦58S、温敏不育系安农S-1和株1S[1YQHCZQie2p908GwXdNFZ2gNYqhgsIDoyZ6tVjO7wHXE=8，19]。育种家需要鉴定和筛选新型、更加优良、能够直接用于两系不育系的选育和改良的优良主效基因源，为两系不育系选育奠定高效和安全生产的基础。